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Coriell Institute細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)和使用方法介紹

發(fā)布日期:2021-08-25      點(diǎn)擊:1516
  一、CoriellInstitute細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法:
  藥敏片的制備:一般情況下,如無(wú)法獲取,可以自行制備。首先定性濾紙,用內(nèi)徑為6mm的打孔器制備好紙片,按每包100片包裝好,高壓滅菌,烘干備用。然后,將待檢藥物用蒸餾水按實(shí)際用量的10倍稀釋,充分溶解后,取1mL加到100片滅菌好的紙片上,放入4℃冰箱,待其充分吸收后(一般要4-8小時(shí)),平鋪于平皿上,在37℃溫箱中充分烘干,干燥后立即封裝于滅菌的小瓶?jī)?nèi),密閉保存。
  二、使用方法:
  培養(yǎng)基的制備:用托盤(pán)天平稱取營(yíng)養(yǎng)瓊脂4克,加入潔凈的容器內(nèi),再用量筒加入200mL蒸餾水,121℃,滅菌20分鐘。滅菌后,冷卻至50-60℃,在超凈臺(tái)內(nèi),迅速將培養(yǎng)基倒入滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi),每個(gè)平皿15mL左右,輕搖平皿,使培養(yǎng)基分布均勻。待其冷卻凝固后,即可使用。
  谷酰胺脫掉基后,可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來(lái)源,參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20℃冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲(chǔ)存兩周以上時(shí),應(yīng)重新加入原來(lái)量的谷酰胺。
  CoriellInstitute細(xì)胞試驗(yàn)操作中常配制高濃度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支),分裝使用,-20℃保存。使用時(shí),每支1ml的谷酰胺加入到99ml*培養(yǎng)基中,使其濃度為2mM培養(yǎng)基。

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